气液色谱柱的填充过程是怎么样的

填充柱制备过程

一、工具：

1 、小型抽气机：两根橡胶管（一根50厘米的硅橡胶管，一根10厘米的普通输液管）

2、橡胶棒（或套上输液管的玻璃棒，用于填柱时敲击用）

3、滴定架，滴定夹

4 、烧杯、药勺

5、小三角漏斗

6 、细金属棍（在柱两端塞玻璃棉用）

二、材料：

空柱（己清洗干净）、填料、去活化玻璃棉。

三、操作步骤

1、把空柱竖直架在滴定架上，两端向上，夹紧。

2 、色谱柱有两种，一种是两端一样长的，另一种是两端一长一短的。两端一样长的在填充时不分方向，而两端一长一短的则有方向性，长的一端接进样器，短的一端接检测器，装柱前要将小三角漏斗接在进样口的一端。用10厘米长左右的软橡胶管将柱和漏斗套在一起，注意要套得较紧，以免加入担体时会外泄。

3、将玻璃棉捏成2 厘米长的一条（不用捏得太小），塞入空柱的接检测器一端，深度约5－10厘米。

4、把约50厘米长的硅橡胶管（普通橡胶管也行，但效果略差）一头接在抽气机上，另一头挡在空柱的接检测器一端。

5、在小漏斗里加入少许担体（约1－2ml左右），用橡胶棒轻轻敲击空柱使担体落入柱管中，开动抽气机1－2秒再关闭，使这少许担体快速到达玻璃棉部位并形成有效阻塞。

6 、一边持续开动抽气机，一边在漏斗里加入担体，并慢慢敲击柱的不同位置，使担体尽量紧密，基本填满时仔细敲击柱，担体紧缩一点就再加入一点，直至无法再紧密为止。如果是玻璃柱，最后填满的位置可以和进检测器端的玻璃棉位置相平，如果是不锈钢柱，则两端都填满至端口。

7、拨掉进样口端的小漏斗，加入一条玻璃棉，塞紧。

8、如果是玻璃柱，要在两端各套上一个胶圈，防止螺母落下时打碎柱。

9 、在柱上做标记后（推荐挂金属小牌），装入柱温箱中老化。

四、其它注意事项

如果是玻璃柱，在操作中要小心折断。但是玻璃柱由于是透明的，可以看到填充效果；不锈钢柱虽然不会折断，可是在填充时看不到效果，只能凭经验填满为止。

在填不锈钢柱时，可以把它拉直填好后再弯曲，填充的效果较好。

涂固定液时应当注意涂渍均匀，要经常搅动溶液但要轻巧，不要损坏单体。

老化时注意保持低的载气流速，逐渐升温，老化要充分，这样才能达到较好的柱效,

检测器端只靠玻璃棉阻塞还是容易将担体吸进真空泵，可以在柱端垫上几层细致透气的织物再接真空泵，这样比较保险。想更保险的话可以在柱后和真空泵之间连接一个玻璃缓冲瓶,不过如果操作足够小心就可以忽略此步。

如果是新手，最好不要一次把几根柱填完，先填一根做试验，积累些具体经验再继续填其它的。